武汉肠道微生物多样性测序方法

病毒宏基因组学的应用：病毒宏基因组学已经应用到人类、动物和环境中，涉及到农业、工业及畜牧业等各个领域，其应用范围已延伸到海洋、湖水、热泉、下水道等无机环境，以及组织病料、血液、呼吸道、动物排泄物等有机环境。应用病毒宏基因组学的方法研究佛罗里达绿海龟的纤维状瘤组织中发现了新型单链DNA病毒（Seaturtletornovirus1，STTV1）。分析了来自马里兰淡水湖中的RNA病毒宏基因组，结果获得淡水湖中30多个RNA病毒家族序列，其中包含小RNA病毒、小双股病毒及正黏病毒等。由于各种微生物所具有的酶系统不完全相同，对许多物质的分解能力亦不一致。武汉肠道微生物多样性测序方法

病毒宏基因组学文库中包含兆级的短序列片段（Reads）。通过不同的序列拼接软件将Reads拼接较长的DNA序列片断（Contigs）。数据组装可通过K-mer分析评估各个样品的测序深度，通过对SOAPdenovo设置不同K值，筛选较好组装结果，对较好组装结果进行校正，并统计Reads利用率。接着利用已测序生物体的DNA序列构建数据库，将拼接后的Contigs通过不同的鉴定方案，与数据库里的DNA序列信息进行比对，确定该序列来自的生物群落，筛选有用的基因信息。此外，还可以用一些工具对序列进行基因预测（如Metagene、GeneMark,FragGeneScan等）。长沙宏基因组测序排行微生物检测中含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物。

状病毒的发现，病原宏基因组测序功不可没：对一种新病毒进行鉴定和检测，其中非常关键的步骤就是获得病毒的全基因组信息。在此次监测和防控中，病原宏基因组测序发挥了至关重要的作用，利用其技术优势，研究人员在五天内就鉴定并分析出的基因组，而2003年SARS的鉴定耗时5月余、2013年H7N9的鉴定耗时1月余。2019-nCoV为线性单链RNA（ssRNA）病毒，基因组全长包含29903个核苷酸，10个基因。病毒基因组序列为进一步分析其传染机理，传播途径，药物靶点等提供了有利的支持。

病毒宏基因组学（Viralmetagenomics）是宏基因组学的一个分支，指研究特定环境中的病毒群落的一门技术。近年来随着新测序技术的不断发展，尤其是第二代、第三代测序仪的出现，使病毒宏基因组学发展尤为迅速。对海洋中病毒群体进行了研究，阐明海水中病毒群体以噬菌体为主，并且是应用宏基因组学分析人粪便中不能培养的病毒群落，标志病毒宏基因组学的开端。病毒宏基因组学这一概念，其描述的是环境中的病毒群落―噬菌体。再次提到病毒宏基因组学这一概念，并对宏基因组学挖掘新病毒的方法进行了阐述，侧重于人和动物机体中的真核病毒群落。病毒是一种非细胞生命形态，它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成。

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由于微生物是对无菌性的重大威胁，对环境微生物的准确鉴定通常是制药行业良好的生产实践(GMP)要求。武汉肠道微生物多样性测序方法

病毒宏基因组测序：可直接对样本中的核酸进行高通量测序，鉴定样本中可能存在的病原菌，辅助临床决策。覆盖细菌、病毒、寄生虫、衣原体、立克次氏体、螺旋体等13396种微生物；同时进行耐药基因检测，涵盖266种耐药菌，2984种抗性基因。宏基因组测序在新发腹泻病毒鉴定中的应用：发现和鉴定新病毒以及确定新病毒与疾病的关系是预防、诊断和新发病毒性传染病的首要任务。高通量测序技术突破了传统技术方法的局限，可以直接以标本中所有的遗传物质为研究对象，从而能够快速地鉴定出标本中存在的病毒，形成了一门研究特定环境中病毒群落的新兴学科：病毒宏基因组学(宏病毒组)。武汉肠道微生物多样性测序方法

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